开云(中国)Kaiyun·官方网站 - 登录入口高偏差标明肿瘤分数高-开云·kaiyun(中国)体育官方网站 登录入口

辩论轮廓开云(中国)Kaiyun·官方网站 - 登录入口

本辩论论述了一例74岁男性患者的凄凉胶质母细胞瘤，主要滋长在软脑膜。患者推崇出面痛、手抖和通晓阻拦，MRI泄露脑干和小脑软脑膜增强，但未见昭彰的瘤块。细胞游离DNA（circulating free DNA, cfDNA）是指在血液或其他体液中游离存在的DNA片断。这些DNA片断频繁源自多种细胞，包括肿瘤细胞、凋一火或坏死的泛泛细胞。cfDNA的分析在医学辩论和临床会诊中具有蹙迫有趣有趣。cfDNA不错用于检测肿瘤特异性突变，匡助会诊癌症、监测肿瘤进展和评估调节反馈。尽管传统细胞学分析未能检测到肿瘤细胞，通过脑脊液中的细胞游离DNA纳米孔测序，辩论东说念主员收效识别出TERT入手子突变和特征性的拷贝数变异。此才能泄露了脑脊液DNA的后劲，动作一种快速且微创的会诊器具，为高等别胶质瘤的阐发提供了有劲左证。这一发现为临床医师在管制同样病例时提供了新的见地，也提供了明确的会诊依据，有助于制定后续的调节决策。

病例论述

患者为74岁的男性，症状为头痛、手抖、步态不稳及通晓阻拦，并在前昔时两个月内自由加剧。患者既往有前方腺癌病史，5年前汲取了辐射调节，2个月前在回肠终局发现神经内分泌肿瘤（neuroendocrine tumor，NET）1级。脑MRI泄露：未见脑骨子内病变，脑干、小脑及颅神经周围软脑膜可见强化（图1a）。其时的辩别会诊包括“神经炎症性疾病”和转机性疾病（不之外前方腺癌的软脑膜转机和1级NET）。除回肠NET外，PET-CT扫描未发现颅外原发肿瘤或转机性病灶。腰椎穿刺获取的脑脊液泄露白细胞数目轻度加多(14个细胞/µl），葡萄糖水公泛泛（2.9 mmol/l），总卵白水平加多（8.75 g/l），与软脑膜转机性疾病一致。在第三次腰椎穿刺时，脑脊液的细胞学和轮回肿瘤细胞分析仍然为阴性。关连词，对cfDNA的下一代测序泄露，端粒酶逆转录酶（telomerase reverse transcriptase, TERT）入手子突变，加强了患者现实上患有软脑膜恶性肿瘤的假定。

图1：临床会诊学图。a MRI增强像泄露小脑和脑桥周围的强化灶（I、II中的箭头）。两侧颅神经VII、VIII的强化（III中的箭头）。b 脑脊液DNA测序所得序列reads的大小散布。c 通过纳米孔测序赢得的CNV图谱。d 肿瘤分类为胶质母细胞瘤-MID

辩论者聘用对脑脊液进行纳米孔测序。从2 ml的脑脊液中索求了约200 ng的DNA。使用调整后的文库准备决策，对100 ng的样本进行测序，得到1800万reads。映射的读长泄露了cfDNA典型的约莫 150个碱基对周期性（图1b），大部分片断在143-175个碱基对界限内。拷贝数变异（copy-number variation，CNV）特征（图1c）泄露了出某些变化，包括PDGFRA和MDM4增益和CDKN2A/B损失，高偏差标明肿瘤分数高。在完好意思或下采样数据集上进行DNA甲基化分析，得到了胶质母细胞瘤、亚型中线（GBM-MID）的高简直度评分（图1d）。进行DNA甲基化分析细目了GBM-MID的分类以及CNV谱的转换。

探求到颅内疾病和临床恶化，患者得到了最佳的解救调节。关联词，患者的病情飞快恶化，很快就亏欠了。病理泄露了分散性增厚和不透明软脑膜，尤其是在额叶（图2a)、小脑和脑干周围。肉眼不雅察未发现脑骨子内有肿瘤肿块。在显微镜下，肿瘤细胞在总计这个词软脑膜中叶俗出现浸润（图2b）。显微镜下泄露肿瘤在脑骨子内稍许滋长，在脑室的室管膜下方（图2c、d）和中脑的皮质下方存在充足性浸润性滋长。肿瘤细胞呈星形胶质细胞方法，细胞核高度不典型，染色质神圣（图2d）。免疫组化证实了肿瘤的胶质性质（Olig2；图2e）。偶尔不雅察到有丝分裂象，但清寒坏死和昭彰的微血管增生。值得着重的是，肿瘤细胞增殖活性通过Ki-67染色泄露为中至高度（约20-30%；图2f）。这些病理成果结合TERT入手子突变的签订，使得不错进行胶质母细胞瘤（IDH野生型）的组分子会诊，这与患者生前脑脊液纳米孔测序所冷漠的会诊交对一致。

图2： 病理。脑切片泄露软脑膜污染增厚（a，白色箭头）。显微镜下，非典型细胞充足散布在软膜腔内（b）。在某些区域，这些细胞也稍许存在于室管膜下/脑室周围，举例伙同海马（c，d，方框），在相邻的深层脑沟中，这些细胞的蕴蓄更为密集（*）。Olig-2（e）和Ki-67（f）的免疫组化染色隔离阐发了肿瘤的胶质性质和增殖活性。L：软膜；CTX：大脑皮层的分子层；HE：苏木精-伊红染色。

商榷

1.辩论者论述了一例IDH野生型胶质母细胞瘤，其主要滋长在软脑膜。这类病例既往很少有报说念，会诊相称具有挑战性。诈欺脑脊液cfDNA的纳米孔测序，进行DNA甲基化分类是一种快速和微创的才能，以赢得径直的会诊冷漠。

2.辩论者假定从脑脊液中回收的多半肿瘤DNA是由于肿瘤细胞与脑脊液之间的大面积地战役。在小且局限性的肿瘤中，cfDNA的获取和测序可能更具挑战性。TERT入手子突变的发现、CNV特征的变化以及高置信度的分类为高等别胶质瘤/胶质母细胞瘤的会诊提供了充分的左证。

3.准确的会诊对患者过甚家属相称有匡助，因为这为继续进行姑息调节奠定了基础。

参考文件：Sol Nik,Kooi Evert-Jan,Pagès-Gallego Marc et al. Glioblastoma, IDH-wildtype with primarily leptomeningeal localization diagnosed by nanopore sequencing of cell-free DNA from cerebrospinal fluid.[J] .Acta Neuropathol, 2024开云(中国)Kaiyun·官方网站 - 登录入口, 148: 35.